이것은 염색되지 않은 샘플에 빛이 침투하는 동안 작은 빛의 편차 또는 위상 변화가 발생하는 광학 현미경입니다. 이러한 위상 변화는 이미지로 변환됩니다. 즉, 빛이 불투명 샘플을 통과할 때 위상 변화로 인해 샘플이 밝아지고 배경에 밝은(밝은) 이미지가 생성됩니다.
위상차 현미경은 투명한 표본으로 작업할 때 고대비 이미지를 생성하므로 특히 미생물 배양, 얇은 조직 조각, 세포 조직 및 세포 이하 입자의 이미지에 해당됩니다.
위상차 현미경의 작동 원리는 광학적 방법을 사용하여 표본을 현미경의 접안렌즈를 통해 볼 수 있는 진폭 이미지로 변환하는 것입니다.
PCM은 염색되지 않은 세포(위상 개체라고도 함)를 보는 데 사용할 수 있습니다. 즉, 세포의 형태가 유지되고 세포가 자연 상태에서 높은 대비와 효과적인 선명도로 관찰될 수 있음을 의미합니다. 이는 표본이 염색되고 고정되면 대부분의 세포가 죽게 되므로 명시야 광학 현미경으로는 제거할 수 없는 특징입니다.
빛이 침투하는 동안 발생하는 변화는 진폭 변화로 변환되어 이미지 대비를 유발합니다.
형광과 같은 대비 강화 요소와 결합되어 표본 이미지를 더 잘 표현할 수 있습니다.
위상차 현미경의 부품
위상차 현미경의 계측은 광원 수신부터 이미지 시각화까지의 광 경로를 기반으로 합니다.
따라서 그 순서는 다음과 같이 구성됩니다.
광원(수은 아크 램프)
단체샷
구멍
콘덴서
링 콘덴서
표본
목적
사진 판
편광
위상 링
위상차 현미경의 특징
편향된 산란(편향)광과 흡수된 시료에 도달하는 편향되지 않은 빛에 의해 발생하는 변화가 특정 파장에서 발생하여 색상을 생성합니다. 산란광과 흡수광에 의해 발생하는 차이를 진폭 변화라고 합니다. 이러한 진폭 변화는 민감하므로 위상차 현미경과 같은 사진 장비로는 시각화할 수 없으며 따라서 사람의 눈에도 볼 수 있습니다.
위상차 현미경의 콘덴서에는 도넛이라는 불투명 디스크가 있고, 투명한 도넛은 샘플을 통과하는 빛의 원뿔을 만듭니다. 빛이 변하면 광학 밀도의 변화로 인해 샘플의 빛 중 일부가 구부러져 대물렌즈에 이미지가 형성됩니다. 편향되지 않은 빛은 위상판의 위상 링에 부딪히며, 편향된 빛은 위상판을 직접 통과하는 위상 링을 놓치고 이미지를 형성합니다.
위상차 현미경은 형광과 같은 대비 강화 기술과 함께 사용할 때 다양한 기능을 수행할 수 있는 대물렌즈로 설계되었습니다. 대물렌즈는 내부 위상판에 위치하여 광 흡수 및 위상 변이(즉, 비회절)를 변경하여 넓은 스펙트럼을 생성하여 샘플을 대조하고 배경에 강한 대비를 생성합니다.
위상차 현미경의 응용
동물 및 식물 세포와 같은 살아있는 세포의 형태를 결정합니다.
미생물의 운동성 및 운동 구조 연구
박테리아 내생포자와 같은 특정 미생물 요소의 검출
